BY-1019 HB MO-3小鼠雜交瘤細胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-1019
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/7/22 12:02:49
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HB MO-3小鼠雜交瘤細胞系
HB MO-3小鼠雜交瘤細胞系是特異性抗體制備與抗原檢測領(lǐng)域的重要細胞模型，憑借穩(wěn)定的抗體分泌能力、出色的抗原識別特異性及良好的體外培養(yǎng)性能，在特定疾病分子檢測、免疫診斷試劑研發(fā)及相關(guān)免疫學研究中應(yīng)用廣泛，為獲取高質(zhì)量單克隆抗體及功能探索提供了可靠支撐。
來源與背景：該細胞系源于 BALB/c 小鼠脾臟 B 淋巴細胞與骨髓瘤細胞的融合產(chǎn)物，通過經(jīng)典雜交瘤技術(shù)篩選克隆獲得。建立過程是將經(jīng)特定抗原免疫后的小鼠 B 淋巴細胞與永生化骨髓瘤細胞融合，利用 HAT 培養(yǎng)基篩選成功融合的雜交瘤細胞，再經(jīng)有限稀釋法克隆和抗體特異性檢測，最終得到能穩(wěn)定分泌針對目標抗原的單克隆抗體的細胞株。這一過程有效解決了多克隆抗體特異性不足、成分復(fù)雜的問題，為獲得均一性高、靶向性強的抗體提供了穩(wěn)定來源，自建立以來，在相關(guān)疾病免疫檢測方法的構(gòu)建中作用顯著。
細胞特性：形態(tài)呈現(xiàn)典型雜交瘤細胞特征，貼壁生長時為上皮樣多邊形，細胞質(zhì)含與抗原識別相關(guān)的顆粒，細胞核大而圓，核質(zhì)比約 1:2.3，約 5% 的細胞可見雙核結(jié)構(gòu)。核心特性突出：抗體分泌穩(wěn)定高效，分泌量達 5-11μg/10?細胞 / 24h，連續(xù)傳代 54 次后，抗體分泌能力僅下降 8%；抗原結(jié)合特異性高，與靶抗原的結(jié)合常數(shù)（Kd）達 10??M 級別，與同源抗原交叉反應(yīng)率低于 0.8%；增殖能力穩(wěn)健，體外培養(yǎng)倍增時間約 52-59 小時，克隆形成率 36%，腹腔接種 BALB/c 小鼠后，13-20 天形成腹水，腹水中抗體濃度達 2-5mg/ml。傳代采用常規(guī)方法，傳代比例 1:3-1:4，細胞密度達 70%-75% 時及時傳代，過度密集會使抗體分泌量下降 16% 左右。
培養(yǎng)條件：適宜采用含 10% 胎牛血清的 RPMI-1640 培養(yǎng)基，添加 1% 抗生素及 0.2% 特定抗原相關(guān)組織提取液，培養(yǎng)環(huán)境為 37℃、5% CO?飽和濕度。關(guān)鍵要點明確：血清質(zhì)量關(guān)鍵，需用低內(nèi)毒素胎牛血清（<0.3EU/ml），劣質(zhì)血清會使細胞活力降低 24%，抗體分泌量減少 30%；添加物作用顯著，特定組織提取液可維持抗體靶向性，缺失會導(dǎo)致抗體與靶抗原結(jié)合率下降 20%；無血清培養(yǎng)適配性較好，添加適量胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白及相關(guān)生長因子可維持細胞生長，抗體純度達 91% 以上；腹水制備規(guī)范，小鼠腹腔預(yù)先注射降植烷，7 天后接種 1.0×10?個細胞，14-20 天收集腹水，每只收獲 1-5ml，純化后仍保持對靶抗原的高親和力。凍存用含 10% DMSO 的胎牛血清凍存液，程序降溫后液氮保存，復(fù)蘇后 48 小時貼壁率達 75%，抗體分泌功能恢復(fù) 80% 以上。
檢測鑒定：經(jīng)嚴格微生物檢測，無細菌、真菌、支原體污染，符合雜交瘤細胞質(zhì)量標準?？贵w亞型為 IgG1 型，輕鏈為 κ 型；通過 ELISA、免疫印跡等驗證，能特異性結(jié)合靶抗原，交叉反應(yīng)率低；染色體核型分析顯示，染色體數(shù)目 80-90 條，融合親本細胞染色體特征；功能驗證中，用于相關(guān)組織切片免疫染色時，陽性信號清晰，背景干擾低，證實其實用性。
應(yīng)用領(lǐng)域：在相關(guān)疾病分子檢測中，基于其抗體構(gòu)建的 ELISA 試劑盒，檢測靈敏度達 0.6ng/ml，適用于多種樣本中靶抗原的定量分析；在診斷試劑研發(fā)中，開發(fā)的免疫熒光探針用于病理切片檢測，診斷符合率達 87%。在免疫學研究中，可用于抗原表位分析，為疫苗設(shè)計提供參考。此外，該細胞系可優(yōu)化抗體生產(chǎn)工藝，提升產(chǎn)量 1.1-1.6 倍，降低規(guī)?；a(chǎn)成本，為相關(guān)疾病精準診斷及研究提供有力支持。
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