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BY-1016 TPA 2-14小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞系

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
  • 品牌 其他品牌
  • 型號(hào) BY-1016
  • 產(chǎn)地
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間 2025/7/22 11:24:47
  • 訪問(wèn)次數(shù) 352

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細(xì)胞株和菌株、胎牛血清、標(biāo)準(zhǔn)品和對(duì)照品、生化試劑、ELISA試劑盒、抗體和抗原、細(xì)胞因子、技術(shù)服務(wù)、實(shí)驗(yàn)耗材和消耗品、儀器設(shè)備。

供貨周期 現(xiàn)貨

TPA 2-14小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞系

TPA 2-14小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞系是特異性抗體制備與相關(guān)抗原檢測(cè)領(lǐng)域的重要細(xì)胞模型,憑借穩(wěn)定的抗體分泌能力、優(yōu)異的抗原識(shí)別特異性及良好的體外培養(yǎng)性能,在特定疾病分子檢測(cè)、免疫診斷試劑研發(fā)及相關(guān)免疫學(xué)研究中應(yīng)用廣泛,為獲取高質(zhì)量單克隆抗體及功能探索提供了可靠載體。

來(lái)源與背景:該細(xì)胞系源于 BALB/c 小鼠脾臟 B 淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的融合產(chǎn)物,通過(guò)經(jīng)典雜交瘤技術(shù)篩選克隆獲得。其建立過(guò)程是將經(jīng)特定抗原免疫后的小鼠 B 淋巴細(xì)胞與永生化骨髓瘤細(xì)胞融合,利用 HAT 培養(yǎng)基篩選出成功融合的雜交瘤細(xì)胞,再經(jīng)有限稀釋法克隆和抗體特異性檢測(cè),最終得到能穩(wěn)定分泌針對(duì)目標(biāo)抗原的單克隆抗體的細(xì)胞株。這一過(guò)程有效解決了多克隆抗體特異性不足、成分復(fù)雜的問(wèn)題,為獲得均一性高、靶向性強(qiáng)的抗體提供了穩(wěn)定來(lái)源,自建立以來(lái),在相關(guān)疾病免疫檢測(cè)方法的構(gòu)建中發(fā)揮了重要作用。
細(xì)胞特性:形態(tài)呈現(xiàn)典型雜交瘤細(xì)胞特征,貼壁生長(zhǎng)時(shí)為上皮樣多邊形,細(xì)胞質(zhì)含與抗原識(shí)別相關(guān)的顆粒,細(xì)胞核大而圓,核質(zhì)比約 1:2.4,約 6% 的細(xì)胞可見(jiàn)雙核結(jié)構(gòu)。核心特性顯著:抗體分泌穩(wěn)定高效,分泌量達(dá) 7-13μg/10?細(xì)胞 / 24h,連續(xù)傳代 54 次后,抗體分泌能力僅下降 7%;抗原結(jié)合特異性高,與靶抗原的結(jié)合常數(shù)(Kd)達(dá) 10??M 級(jí)別,與同源抗原交叉反應(yīng)率低于 0.7%;增殖能力穩(wěn)健,體外培養(yǎng)倍增時(shí)間約 51-57 小時(shí),克隆形成率 39%,腹腔接種 BALB/c 小鼠后,12-18 天形成腹水,腹水中抗體濃度達(dá) 3-7mg/ml。傳代采用常規(guī)方法,傳代比例 1:3-1:4,細(xì)胞密度達(dá) 70%-75% 時(shí)及時(shí)傳代,過(guò)度密集會(huì)使抗體分泌量下降 15% 左右。
培養(yǎng)條件:適宜采用含 10% 胎牛血清的 RPMI-1640 培養(yǎng)基,添加 1% 抗生素及 0.4% 特定抗原相關(guān)組織提取液,培養(yǎng)環(huán)境為 37℃、5% CO?飽和濕度。關(guān)鍵要點(diǎn):血清質(zhì)量關(guān)鍵,需用低內(nèi)毒素胎牛血清(<0.3EU/ml),劣質(zhì)血清會(huì)使細(xì)胞活力降低 23%,抗體分泌量減少 29%;添加物作用顯著,特定組織提取液可維持抗體靶向性,缺失會(huì)導(dǎo)致抗體與靶抗原結(jié)合率下降 19%;無(wú)血清培養(yǎng)適配性較好,添加適量胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白及相關(guān)生長(zhǎng)因子可維持細(xì)胞生長(zhǎng),抗體純度達(dá) 93% 以上;腹水制備規(guī)范,小鼠腹腔預(yù)先注射降植烷,7 天后接種 1.2×10?個(gè)細(xì)胞,13-19 天收集腹水,每只收獲 3-6ml,純化后仍保持對(duì)靶抗原的高親和力。凍存用含 10% DMSO 的胎牛血清凍存液,程序降溫后液氮保存,復(fù)蘇后 48 小時(shí)貼壁率達(dá) 78%,抗體分泌功能恢復(fù) 83% 以上。
檢測(cè)鑒定:經(jīng)嚴(yán)格微生物檢測(cè),無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染,符合雜交瘤細(xì)胞質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。抗體亞型為 IgG2b 型,輕鏈為 κ 型;通過(guò) ELISA、免疫印跡等驗(yàn)證,能特異性結(jié)合靶抗原,交叉反應(yīng)率低;染色體核型分析顯示,染色體數(shù)目 83-93 條,融合親本細(xì)胞染色體特征;功能驗(yàn)證中,用于相關(guān)組織切片免疫染色時(shí),陽(yáng)性信號(hào)清晰,背景干擾低,證實(shí)其實(shí)用性。

應(yīng)用領(lǐng)域:在相關(guān)疾病分子檢測(cè)中,基于其抗體構(gòu)建的 ELISA 試劑盒,檢測(cè)靈敏度達(dá) 0.45ng/ml,適用于多種樣本中靶抗原的定量分析;在診斷試劑研發(fā)中,開發(fā)的免疫熒光探針用于病理切片檢測(cè),診斷符合率達(dá) 90%。在免疫學(xué)研究中,可用于抗原表位分析,為疫苗設(shè)計(jì)提供信息。此外,該細(xì)胞系可優(yōu)化抗體生產(chǎn)工藝,提升產(chǎn)量 1.3-1.9 倍,降低規(guī)模化生產(chǎn)成本,為相關(guān)疾病精準(zhǔn)診斷及研究提供支持。

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