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BY-1002 Hybrid Liver cell GLH04鼠/人雜交瘤細(xì)胞系
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào) BY-1002
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2025/7/22 10:35:16
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細(xì)胞株和菌株、胎牛血清、標(biāo)準(zhǔn)品和對(duì)照品、生化試劑、ELISA試劑盒、抗體和抗原、細(xì)胞因子、技術(shù)服務(wù)、實(shí)驗(yàn)耗材和消耗品、儀器設(shè)備。
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
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Hybrid Liver cell GLH04鼠/人雜交瘤細(xì)胞系
Hybrid Liver cell GLH04鼠/人雜交瘤細(xì)胞系是肝相關(guān)單克隆抗體制備與肝臟疾病研究領(lǐng)域的重要細(xì)胞模型，憑借跨物種融合的du特優(yōu)勢(shì)、穩(wěn)定分泌肝特異性抗體及優(yōu)異的肝組織抗原識(shí)別能力，在肝臟疾病診斷、肝靶向藥物研發(fā)及肝免疫學(xué)研究中應(yīng)用廣泛，為肝相關(guān)單克隆抗體的獲取與功能研究提供了可靠支撐。
來(lái)源與背景：該細(xì)胞系源于 Wistar 大鼠肝臟相關(guān) B 淋巴細(xì)胞與人類骨髓瘤細(xì)胞的融合產(chǎn)物，通過(guò)改良雜交瘤技術(shù)篩選克隆獲得。建立過(guò)程是將經(jīng)肝特異性抗原免疫后的大鼠 B 淋巴細(xì)胞與永生化人骨髓瘤細(xì)胞融合，利用 HAT 培養(yǎng)基結(jié)合物種特異性標(biāo)志物篩選成功融合的雜交瘤細(xì)胞，經(jīng)有限稀釋法克隆和抗體肝靶向性檢測(cè)，得到能穩(wěn)定分泌針對(duì)肝靶抗原的單克隆抗體的細(xì)胞株。此跨物種融合過(guò)程結(jié)合了大鼠對(duì)肝抗原的強(qiáng)免疫應(yīng)答和人類細(xì)胞的臨床相關(guān)性，解決了單一物種雜交瘤在肝抗原識(shí)別與臨床應(yīng)用適配性上的局限，為獲取高特異性、高臨床價(jià)值的肝相關(guān)抗體提供了創(chuàng)新來(lái)源，在肝臟疾病免疫檢測(cè)體系構(gòu)建中作用顯著。
細(xì)胞特性：形態(tài)呈跨物種雜交瘤特征，貼壁生長(zhǎng)時(shí)為上皮樣與梭形混合形態(tài)，細(xì)胞質(zhì)含豐富肝相關(guān)細(xì)胞器，細(xì)胞核呈橢圓形，核質(zhì)比約 1:2.2，約 7% 的細(xì)胞可見(jiàn)多核結(jié)構(gòu)。核心特性突出：抗體分泌穩(wěn)定，分泌量達(dá) 7-13μg/10?細(xì)胞 / 24h，連續(xù)傳代 54 次后，抗體分泌能力僅下降 8%；肝抗原結(jié)合特異性強(qiáng)，與肝靶抗原的結(jié)合常數(shù)（Kd）達(dá) 10??M 級(jí)別，與非肝組織抗原交叉反應(yīng)率低于 0.7%；增殖能力良好，體外培養(yǎng)倍增時(shí)間約 53-59 小時(shí)，克隆形成率 38%，腹腔接種 SCID 小鼠后，15-21 天形成腹水，腹水中抗體濃度達(dá) 2-6mg/ml。傳代采用溫和方法，傳代比例 1:2-1:3，細(xì)胞密度達(dá) 65%-70% 時(shí)及時(shí)傳代，過(guò)度密集會(huì)使抗體分泌量下降 18% 左右。
培養(yǎng)條件：適宜用含 12% 胎牛血清的 DMEM/F12 混合培養(yǎng)基（比例 2:1），添加 1% 雙抗及 0.4% 肝組織提取液，培養(yǎng)環(huán)境為 37℃、5% CO?與 4% O?的微低氧環(huán)境。關(guān)鍵要點(diǎn)：培養(yǎng)基適配性重要，此 DMEM 與 F12 比例可提升細(xì)胞活力 14%，肝組織提取液維持抗體肝靶向性；血清質(zhì)量嚴(yán)格，需用超低內(nèi)毒素胎牛血清（<0.2EU/ml），劣質(zhì)血清會(huì)使細(xì)胞跨物種特性丟失 26%，抗體分泌量減少 33%；無(wú)血清培養(yǎng)需特定配方，添加肝特異性生長(zhǎng)因子復(fù)合物可維持細(xì)胞生長(zhǎng)，且利于抗體人源化修飾；腹水制備規(guī)范，SCID 小鼠腹腔預(yù)先注射弗氏不wan全佐劑，10 天后接種 1.4×10?個(gè)細(xì)胞，17-23 天收集腹水，每只收獲 2-4ml，純化后保持對(duì)人肝組織高親和力。凍存用含 15% DMSO 與 5% 人血清白蛋白的凍存液，程序降溫后液氮保存，復(fù)蘇后 72 小時(shí)貼壁率達(dá) 75%，抗體分泌功能恢復(fù) 81% 以上。
檢測(cè)鑒定：經(jīng)嚴(yán)格檢測(cè)，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體及反轉(zhuǎn)錄病毒污染，符合跨物種雜交瘤細(xì)胞質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)?？贵w亞型為大鼠 IgG2a 型，輕鏈含人源化修飾特征；通過(guò) ELISA、免疫組化等驗(yàn)證，能特異性結(jié)合人肝組織靶抗原，與肝外組織交叉反應(yīng)率低于 0.6%；染色體核型分析顯示，染色體數(shù)目 104-114 條，融合大鼠（約 38%）與人類（約 62%）染色體特征，存在物種特異性染色體易位；功能驗(yàn)證中，用于人肝組織切片免疫染色時(shí)，精準(zhǔn)定位肝靶抗原，陽(yáng)性信號(hào)集中于特定區(qū)域，背景干擾低，證實(shí)其檢測(cè)精準(zhǔn)性。
應(yīng)用領(lǐng)域：在肝疾病分子檢測(cè)中，基于其抗體構(gòu)建的 ELISA 試劑盒，檢測(cè)靈敏度達(dá) 0.4ng/ml，適用于肝衰竭、肝硬化等疾病的血清標(biāo)志物分析；在診斷試劑研發(fā)中，開發(fā)的免疫熒光探針用于肝穿刺組織切片染色，對(duì)早期肝損傷診斷符合率達(dá) 91%。在肝免疫學(xué)研究中，可繪制肝抗原表位圖譜，為肝靶向藥物設(shè)計(jì)提供靶點(diǎn)。此外，因含人源成分，在抗體人源化改造中具優(yōu)勢(shì)，經(jīng)基因編輯可使人源化程度達(dá) 84% 以上，降低免疫排斥風(fēng)險(xiǎn)，為肝相關(guān)單克隆抗體藥物研發(fā)提供高效平臺(tái)，推動(dòng)肝臟疾病精準(zhǔn)診斷與治療發(fā)展。
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