Mogengel^®細(xì)胞成管培養(yǎng)板(15孔)

1、 產(chǎn)品描述

Mogengel^®細(xì)胞成管培養(yǎng)板(15孔)是?；锍晒軐?shí)驗(yàn)專用高品質(zhì)耗材系列產(chǎn)品簡(jiǎn)稱15孔成管培養(yǎng)板，適用于細(xì)胞體外形成管狀結(jié)構(gòu)。

2、 產(chǎn)品信息

3、 預(yù)期用途

Mogengel^®細(xì)胞成管培養(yǎng)板(15孔)用于內(nèi)皮細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞在體外3D環(huán)境（ECM）中形成管狀腔體，用于研究某些基因或藥物對(duì)這一過程的影響?；凇澳[瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移依賴于血管新生”理論，該實(shí)驗(yàn)也用于腫瘤的發(fā)生機(jī)制研究。此類研究是腫瘤研究過程中的，但成本昂貴，本產(chǎn)品旨在減少成管實(shí)驗(yàn)的試劑及細(xì)胞用量，降低科學(xué)研究成本。

注意事項(xiàng)：在使用時(shí)應(yīng)始終穿戴，在處理諸如人體細(xì)胞或其他生物及有害物質(zhì)時(shí)應(yīng)遵循安全的實(shí)驗(yàn)室規(guī)程。

僅用于科學(xué)研究。

4、 使用說明：類器官培養(yǎng)

a)     實(shí)驗(yàn)用品

Mogengel^®細(xì)胞成管培養(yǎng)板(15孔)、Mogengel^® Matrix標(biāo)準(zhǔn)型基質(zhì)膠（貨號(hào)：0827045）、所需細(xì)胞及培養(yǎng)基；

b)      實(shí)驗(yàn)用品

b.1、凝膠

在培養(yǎng)板下室中加入8-10μL基質(zhì)膠，注意不要產(chǎn)生氣泡。置于37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱中凝膠5-15min。

b.2、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

對(duì)不同細(xì)胞提前饑餓或直接消化獲取預(yù)期狀態(tài)的細(xì)胞后，使用細(xì)胞培養(yǎng)基重懸稀釋至相應(yīng)細(xì)胞數(shù)量，吸取50μL加入Mogengel^®細(xì)胞成管培養(yǎng)板(15孔)中，置于37℃培養(yǎng)箱放置4-8h，預(yù)實(shí)驗(yàn)可間隔一定時(shí)間觀測(cè)確認(rèn)相關(guān)細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)參數(shù)。

表1 HUVEC血管形成實(shí)驗(yàn)細(xì)胞用量

b.3、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

使用智能顯微鏡系統(tǒng)拍攝跟蹤管形成過程，啟動(dòng)實(shí)時(shí)智能成管數(shù)據(jù)分析后，導(dǎo)出數(shù)據(jù)。若無相關(guān)設(shè)備，則可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求進(jìn)入步驟“b.4”。

b.4、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

1）染料稀釋：使用無血清培養(yǎng)基（如DMEM）稀釋的鈣黃綠素 (12.5 µl calcein stock 1 µg/µl)，終濃度為 6.25 µg/ml；

2）移除上孔內(nèi)培養(yǎng)基，加入10μl鈣黃綠素稀釋液；

3）室溫下避光孵育30分鐘后，使用無菌PBS蕩洗三次；

4）使用 485 nm/ 529 nm通道進(jìn)行免疫熒光成像。

b.5、圖像采集

染色后，使用2倍鏡采集管形成狀態(tài)（或直接采集明場(chǎng)圖片），使用圖像分析軟件分析管面積、管長(zhǎng)度、管數(shù)量、環(huán)面積、環(huán)數(shù)量和芽數(shù)量等參數(shù)，進(jìn)行后續(xù)數(shù)據(jù)分析。