SILAC技術(shù)如何改變蛋白表達(dá)分析的精準(zhǔn)度？檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹

解析蛋白表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化是理解疾病機(jī)制、藥物靶點(diǎn)發(fā)現(xiàn)和細(xì)胞生物學(xué)的重要基礎(chǔ)。然而，dànbáizhì定量方法（如染料標(biāo)記、Western blot或非biāojìdìng量）往往存在批間差異大、定量精度低、重復(fù)性差等問(wèn)題。SILAC技術(shù)（Stable Isotope Labeling by Amino acids in Cell culture）的出現(xiàn)，為jīngzhǔn、可重復(fù)的蛋白表達(dá)分析帶來(lái)了革命性突破。

一、什么是SILAC技術(shù)？——細(xì)胞內(nèi)源標(biāo)記的“黃金標(biāo)準(zhǔn)”

SILAC技術(shù)是基于細(xì)胞培養(yǎng)的穩(wěn)定同位素標(biāo)記技術(shù)，通過(guò)在培養(yǎng)基中添加帶有穩(wěn)定同位素（如13C或15N）的必需氨基酸，使目標(biāo)細(xì)胞在代謝過(guò)程中將這些“重”氨基酸整合進(jìn)自身合成的dànbáizhì中。通過(guò)將“輕標(biāo)記”和“重標(biāo)記”細(xì)胞共培養(yǎng)或混合處理后，再經(jīng)質(zhì)譜分析，即可實(shí)現(xiàn)jīngquè的相對(duì)定量。相較于TMT或iTRAQ等化學(xué)標(biāo)簽方法，SILAC屬于"代謝內(nèi)源標(biāo)記"，具有無(wú)需額外標(biāo)記步驟、避免技術(shù)誤差傳播、對(duì)樣本影響小等顯著優(yōu)勢(shì)，尤其適合研究細(xì)胞響應(yīng)、時(shí)間依賴(lài)性變化與蛋白互作等問(wèn)題。

二、SILAC如何提升蛋白表達(dá)分析的jīngzhǔn度？

1、天然內(nèi)源標(biāo)記，消除樣本處理誤差

SILAC標(biāo)記在細(xì)胞內(nèi)部進(jìn)行，無(wú)需在蛋白提取后再額外標(biāo)記，大幅減少了因樣本處理步驟帶來(lái)的變異，是目前誤差zuì小的定量方式之一。這種內(nèi)源性標(biāo)記的方式保障了實(shí)驗(yàn)條件的一致性和數(shù)據(jù)的高可信度。

2、樣本共處理，提高可重復(fù)性

輕標(biāo)記和重標(biāo)記的樣本在裂解、消化、富集、上機(jī)等環(huán)節(jié)始終同時(shí)處理，技術(shù)重復(fù)性顯著優(yōu)于TMT、iTRAQ等異源標(biāo)記方法。對(duì)于需要多次重復(fù)實(shí)驗(yàn)或?qū)Σ町惐稊?shù)敏感的研究，SILAC展現(xiàn)出穩(wěn)定可靠的定量性能。

3、與高分辨率質(zhì)譜聯(lián)用，支持高通量分析

結(jié)合Orbitrap等高精度質(zhì)譜平臺(tái)，SILAC技術(shù)可實(shí)現(xiàn)數(shù)千種蛋白的高通量、線(xiàn)性范圍廣、低豐度蛋白jīngzhǔn檢測(cè)。尤其在研究蛋白翻譯后調(diào)控、泛素化、磷酸化等修飾時(shí)，SILAC表現(xiàn)出良好的兼容性和定量能力。

4、動(dòng)態(tài)調(diào)控研究的理想選擇

SILAC技術(shù)適合追蹤細(xì)胞在特定處理（如藥物刺激、信號(hào)激活、時(shí)間變化）后的蛋白表達(dá)動(dòng)態(tài)，廣泛應(yīng)用于時(shí)間序列分析、細(xì)胞周期監(jiān)測(cè)、應(yīng)激反應(yīng)研究等場(chǎng)景。

三、應(yīng)用場(chǎng)景：從基礎(chǔ)研究到藥物開(kāi)發(fā)

1、信號(hào)通路研究：SILAC被廣泛用于追蹤刺激前后細(xì)胞內(nèi)信號(hào)蛋白的變化，識(shí)別關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)和調(diào)控機(jī)制。

2、藥物作用機(jī)制解析：通過(guò)比較處理前后的蛋白表達(dá)譜，輔助鑒定藥物靶點(diǎn)及其下游通路。

3、腫瘤與免疫研究：揭示癌細(xì)胞與免疫細(xì)胞在相同刺激條件下的蛋白應(yīng)答差異，推動(dòng)jīngzhǔn醫(yī)療研究。

4、細(xì)胞互作與蛋白互作研究：通過(guò)SILAC-IP（免疫共沉淀結(jié)合SILAC）實(shí)現(xiàn)互作蛋白的高特異性篩選。

百泰派克生物科技的SILAC平臺(tái)優(yōu)勢(shì)

百泰派克生物科技構(gòu)建了以SILAC技術(shù)為核心的高精度蛋白組學(xué)平臺(tái)，支持人類(lèi)、鼠類(lèi)等常見(jiàn)細(xì)胞系的穩(wěn)定同位素標(biāo)記，并可根據(jù)客戶(hù)需求定制適配培養(yǎng)體系、標(biāo)記策略與實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。我們的服務(wù)優(yōu)勢(shì)包括：

1、多種重氨基酸標(biāo)記方案可選（如13C6-Lys, 13C6-Arg）

2、嚴(yán)格控制標(biāo)記效率（>95%）

3、聯(lián)用Orbitrap Exploris 480等*質(zhì)譜系統(tǒng)

4、標(biāo)準(zhǔn)化數(shù)據(jù)分析流程，支持MaxQuant、Perseus等主流軟件

5、經(jīng)驗(yàn)豐富的團(tuán)隊(duì)保障實(shí)驗(yàn)成功率和數(shù)據(jù)解讀深度

在追求定量jīngzhǔn性和生物學(xué)解釋力的道路上，SILAC技術(shù)無(wú)疑是zhídexìnlài的方案。它不僅提升了蛋白表達(dá)分析的精度，更推動(dòng)了蛋白組學(xué)向系統(tǒng)生物學(xué)和轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)邁進(jìn)。若您正在尋找可靠的SILAC定量解決方案，歡迎聯(lián)系百泰派克生物科技——我們?yōu)槟峁└哔|(zhì)量、數(shù)據(jù)可發(fā)表的蛋白組學(xué)服務(wù)。

百泰派克生物科技特色項(xiàng)目

一、蛋白測(cè)序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測(cè)序系統(tǒng)對(duì)dànbáizhì序列進(jìn)行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測(cè)序分析服務(wù)，包括對(duì)dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對(duì)于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測(cè)序法的dànbáizhì從頭測(cè)序服務(wù)，對(duì)蛋白序列進(jìn)行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.采用目前世界上*的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實(shí)現(xiàn)對(duì)所測(cè)定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測(cè)定蛋白N端多達(dá) 70個(gè)氨基酸序列;

4.可測(cè)定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測(cè);

6.測(cè)序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺(tái)結(jié)合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學(xué)、靶向dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種dànbáizhì組學(xué)分析服務(wù)。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學(xué)服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1 .高通量定量蛋白分析:多對(duì)照組大規(guī)模實(shí)驗(yàn)分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法，適用于分析組織、細(xì)胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測(cè)較低豐度蛋白，線(xiàn)性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。

三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細(xì)胞原理分離單個(gè)細(xì)胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個(gè)細(xì)胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號(hào)分子表達(dá)量。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.技術(shù)*，*技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問(wèn)題。可在單細(xì)胞層面上對(duì)多種指標(biāo)同時(shí)進(jìn)行表征，百泰派克生物科技可做到同時(shí)檢測(cè)51個(gè)目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個(gè)左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)了數(shù)量級(jí)的提高，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會(huì)有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測(cè)細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專(zhuān)有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實(shí)現(xiàn)10,000個(gè)以上I型多肽和10,000個(gè)以上II型多肽的鑒定和識(shí)別。通過(guò)我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺(tái)進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識(shí)別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo)。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級(jí)結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測(cè)平臺(tái)

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測(cè)和項(xiàng)目驗(yàn)證等zhuānyè服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過(guò)CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計(jì)量/期間核查，軟件審計(jì)追蹤，為客戶(hù)提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā)、藥物申報(bào)注冊(cè)和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測(cè)分析服務(wù)；

2.獲國(guó)家CNAS實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可，為客戶(hù)提供符合*藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細(xì)胞分析、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測(cè)平臺(tái)，滿(mǎn)足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶(hù)的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

SILAC技術(shù)如何改變蛋白表達(dá)分析的精準(zhǔn)度？檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹