大昌洋行(上海)有限公司(大昌華嘉科學(xué)儀器部)
正交技術(shù)研究pH、蔗糖和精氨酸鹽對單克隆抗體長期儲存過程中物理穩(wěn)定性和聚集的影響
檢測樣品:單克隆抗體
檢測項(xiàng)目:物理穩(wěn)定性 聚集
方案概述:了解添加劑對治療蛋白穩(wěn)定性的影響對于獲得穩(wěn)定的配方至關(guān)重要。作者應(yīng)用了幾種高通量和中通量的方法來研究模型單克隆抗體在pH 5.0和6.5的條件下,蔗糖,鹽酸精氨酸和精氨酸谷氨酸存在的物理穩(wěn)定性。在低離子強(qiáng)度緩沖液中,鹽的加入降低了抗體的膠態(tài)和熱穩(wěn)定性,歸因于靜電相互作用的增加。
了解添加劑對治療蛋白穩(wěn)定性的影響對于獲得穩(wěn)定的配方至關(guān)重要。在這項(xiàng)工作中,作者應(yīng)用了幾種高通量和中通量的方法來研究模型單克隆抗體在pH 5.0和6.5的條件下,蔗糖,鹽酸精氨酸和精氨酸谷氨酸存在的物理穩(wěn)定性。在低離子強(qiáng)度緩沖液中,鹽的加入降低了抗體的膠態(tài)和熱穩(wěn)定性,歸因于靜電相互作用的增加。精氨酸鹽中谷氨酸離子的存在部分降低了離子強(qiáng)度增加的損傷作用。添加280mM蔗糖后,熱蛋白的展開溫度升高。使用濃度的精氨酸鹽降低了尿素重折疊后的相對單體產(chǎn)率,而蔗糖對抗體重折疊有較好的作用。此外,作者還展示了12個月的長期穩(wěn)定性數(shù)據(jù),并觀察了熱蛋白穩(wěn)定性、再折疊后的相對單體收率和單體在貯藏過程中的損失之間的相關(guān)性。貯存過程中單體的損失與某些配方中的蛋白質(zhì)聚集和亞可見顆粒的形成有關(guān)。本研究表明,常用添加劑對抗體長期物理穩(wěn)定性的影響可以通過正交生物物理測量來預(yù)測。
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