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研域(上海)化學(xué)試劑有限公司

ELISA實驗之入門小技巧

時間:2025-7-15閱讀:103

對于ELISA實驗新手們來說,一場實驗下來還是有一定難度的,主要是因為還沒有掌握一些實驗中的小技巧,掌握了實驗技巧之后,做ELISA實驗會容易很多。今天就為大家分享ELISA實驗的入門小技巧,一起來看看吧!

1、加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。

2、合理安排檢測量,以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。

3、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。

4、要盡量做雙孔實驗,這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準確性,又能反映出試劑盒的精密度。

5、樣品稀釋液應(yīng)用加液器加注,并經(jīng)常校對其準確性。

6、為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標板加上蓋或覆膜。

7、未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃保存。辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液請依據(jù)所需的量配置使用。請勿重復(fù)使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液。

8、ELISA實驗中,加樣后及時放入孵箱,標本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗。

9、剩余樣品及廢棄物應(yīng)經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。 

10、每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調(diào)OD值至零。 

11、手工洗板時每次加入洗滌液后。應(yīng)靜置15~30s,不要將一個酶標孔中的洗滌液濺入另一酶標孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干。

12、沒有去離子水或雙蒸水時,可以使用純凈水配制溶液,切勿使用自來水。

13、在使用微量加樣器時,吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭。

14、吸取液體時速度不易太快,以免產(chǎn)生氣泡。

以上就是ELISA實驗的一些入門小技巧,掌握了這些小技巧,做ELISA實驗就會容易很多。 

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