賽默飛液相色譜儀作為分析化學(xué)領(lǐng)域的核心工具,憑借其高效分離能力和精準(zhǔn)檢測(cè)性能,廣泛應(yīng)用于藥物研發(fā)、環(huán)境監(jiān)測(cè)及食品安全等領(lǐng)域。其核心原理基于混合物中各組分在固定相與流動(dòng)相間的分配系數(shù)差異,通過(guò)高壓驅(qū)動(dòng)流動(dòng)相攜帶樣品流經(jīng)色譜柱,實(shí)現(xiàn)組分的物理分離。檢測(cè)器將洗脫后的化合物轉(zhuǎn)化為電信號(hào),最終生成以保留時(shí)間為橫軸、檢測(cè)器響應(yīng)值為縱軸的色譜圖。
一、操作流程:標(biāo)準(zhǔn)化與精細(xì)化并重
1.流動(dòng)相配制與脫氣
選用色譜純?nèi)軇ㄈ缫译?、甲醇)按比例混合,?jīng)0.45μm微孔濾膜過(guò)濾后,通過(guò)超聲脫氣10—20分鐘以消除氣泡。例如,含緩沖鹽的流動(dòng)相需延長(zhǎng)脫氣時(shí)間至5分鐘,避免泵送過(guò)程中產(chǎn)生氣泡干擾。
2.色譜柱平衡與樣品預(yù)處理
根據(jù)分析目標(biāo)選擇C18、硅膠等填料類(lèi)型的色譜柱,以1.0mL/min流速用流動(dòng)相平衡30—60分鐘,期間監(jiān)測(cè)基線穩(wěn)定性。樣品需過(guò)濾去除顆粒物,酸性樣品可添加1%醋酸改善峰形,堿性樣品則加入10—20mmol/L三乙胺減少拖尾。
3.儀器初始化與參數(shù)設(shè)置
依次啟動(dòng)泵、進(jìn)樣器、柱溫箱及檢測(cè)器電源,通過(guò)Chromeleon CDS軟件設(shè)置流動(dòng)相比例(如A:B=40:60)、流速(0.2—2.0mL/min)及檢測(cè)波長(zhǎng)(如230nm)。對(duì)于梯度洗脫,需定義多階段溶劑比例變化程序。
4.進(jìn)樣分析與數(shù)據(jù)采集
將標(biāo)準(zhǔn)品與樣品置于自動(dòng)進(jìn)樣器,啟動(dòng)序列分析。系統(tǒng)自動(dòng)完成進(jìn)樣、分離及檢測(cè),生成色譜圖后,利用軟件積分功能處理峰面積與保留時(shí)間數(shù)據(jù)。若出現(xiàn)拖尾峰,需調(diào)整流動(dòng)相pH或更換色譜柱。
5.關(guān)機(jī)維護(hù)與色譜柱保護(hù)
分析結(jié)束后,先用甲醇-水(5:95)沖洗色譜柱30分鐘,再用100%甲醇沖洗30分鐘以去除殘留物。關(guān)閉軟件后,依次關(guān)閉各模塊電源,并填寫(xiě)使用記錄。日常維護(hù)包括每日用稀硝酸清洗過(guò)濾器、定期反沖色譜柱(如異丙醇-二氯甲烷1:1混合液)以延長(zhǎng)壽命。

二、技術(shù)優(yōu)勢(shì):創(chuàng)新驅(qū)動(dòng)分析效能
賽默飛液相色譜儀通過(guò)集成四元高壓溶劑混合技術(shù)、智能流速控制及生物兼容性設(shè)計(jì),實(shí)現(xiàn)從常規(guī)分析到高通量篩查的全場(chǎng)景覆蓋。例如,Vanquish Horizon UHPLC系統(tǒng)配備1.5μm實(shí)心核粒子色譜柱,結(jié)合雙模式恒溫控制,可在1200bar壓力下實(shí)現(xiàn)亞2分鐘級(jí)分離,顯著提升實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)出效率。其與Orbitrap質(zhì)譜儀的聯(lián)用,更將檢測(cè)靈敏度提升至200fg級(jí)別,滿足復(fù)雜基質(zhì)中痕量組分的精準(zhǔn)定量需求。
從原理到操作,賽默飛液相色譜儀以科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)脑O(shè)計(jì)與智能化軟件支持,為分析化學(xué)研究提供了可靠的技術(shù)保障。通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)化流程與精細(xì)化維護(hù),用戶可較大化發(fā)揮儀器性能,推動(dòng)科研與產(chǎn)業(yè)應(yīng)用的深度融合。
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