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固相萃取儀裝置使用方法詳解
閱讀：90發(fā)布時間：2025-7-15
一、固相萃取儀核心原理與裝置組成
固相萃取儀(SPE)通過固體吸附劑選擇性吸附液體樣品中的目標化合物，實現(xiàn)與基體及干擾物的分離，再經(jīng)洗脫或解吸附富集目標物。其核心裝置包括：
固相萃取柱：由醫(yī)用聚丙烯柱管、多孔聚丙烯篩板(20μm)及填料(40-60μm或80-100μm)組成，常見規(guī)格如100mg/1ml、500mg/3ml等。
真空系統(tǒng)：包括真空泵、壓力表、緩沖瓶，用于提供負壓促進樣品通過萃取柱。
收集裝置：試管架(12/24位可調)、收集瓶，用于收集洗脫液。
輔助部件：大體積上樣器、StopCock閥(精確控制流速)、防交叉污染裝置。
二、操作前準備：細節(jié)決定成敗
環(huán)境與安全
確保操作臺穩(wěn)固、無積水、無酸堿腐蝕，遠離空調直吹(防止儀器老化)。
佩戴防護手套及護目鏡，核查實驗室穩(wěn)壓電源，檢查廢液收集瓶容量。
樣品與試劑準備
樣品處理：
液相樣品：直接進樣。
固態(tài)樣品：溶解后過濾(0.45μm濾膜)、離心或稀釋至合適濃度。
試劑選擇：
萃取柱：根據(jù)目標物性質選擇填料(如C18柱適用于非極性物質，NH2柱適用于酸性化合物)。
活化溶劑：反相柱用甲醇(6倍柱體積)→ 水(4倍柱體積)；正相柱用樣品所在有機溶劑；離子交換柱用3-5ml去離子水。
設備檢查
檢查真空泵輸出壓力(<0.1MPa，負壓>-0.09MPa)，確認各通道密封墊無異物。
獨立控制通道需提前確認開啟狀態(tài)，避免壓力異常。
三、操作步驟：標準化流程與關鍵參數(shù)
活化萃取柱
目的：去除雜質，創(chuàng)造適宜溶劑環(huán)境。
方法：依次用甲醇(6倍柱體積)、水(4倍柱體積)以0.5-1ml/min流速通過萃取柱，觀察篩板表面呈水平光滑浸潤面。
上樣
方法：將樣品溶液緩慢加入萃取柱，控制總上樣量≤柱體積2000倍(如1ml柱體最多處理2L樣品)。
流速：生物檢材類≤5ml/min，工業(yè)廢水類≤15ml/min，每通過300ml暫停檢查液壓表指針是否穩(wěn)定在綠色區(qū)。
收集：目標化合物隨樣品基液流出時開始收集，雜質被保留在柱上。
淋洗(除雜)
目的：去除干擾物，保留目標物。
方法：用5ml含0.1%乙酸水溶液三次過柱，流速與上樣階段一致。
洗脫
目的：用小體積溶劑洗脫目標物。
方法：
單體系洗脫：75% 0.35mol/L甲醇 + 25%丙酮混合溶液，流速調低至初始階段65%。
雙體系洗脫：交替使用兩種溶劑，記錄各組接收管編號。
洗脫體積：避免過大(可通過減少溶劑用量或縮短時間控制)。
后處理
洗脫液處理：干燥(氮氣吹干)、重溶(甲醇/水)或濃縮(旋轉蒸發(fā))。
柱再生：蒸餾水循環(huán)沖洗30分鐘 → 60%甲醇維持45分鐘，拆除后置于真空干燥器保存。
四、操作后維護：延長設備壽命
清潔與存放
清潔：用去離子水或清洗劑沖洗管路，直至無殘留。
存放：防潮、防塵、避光，長期未使用需啟用自動排液模式消除泵內存液，每月啟動自檢程序防止密封件粘連。
數(shù)據(jù)記錄與關機
登記機時、機型碼、樣品pH參數(shù)至《使用登記本》。
關閉主電源總控斷路器，核查關機指示燈狀態(tài)。
五、常見問題與解決方案
萃取柱堵塞
原因：樣品含顆粒物或填料松動。
解決：用甲醇反向沖洗(低流速)，若無效則更換萃取柱。
洗脫效果差
原因：洗脫溶劑選擇不當或流速過快。
解決：優(yōu)化洗脫條件(如增加甲醇比例)，降低流速至初始階段65%。
壓力異常
原因：密封墊漏氣或通道未關閉。
解決：檢查密封墊平整性，關閉無需使用的通道。
江蘇綠盟科學儀器有限公司主營產(chǎn)品：泵保護過濾器-溶劑抽濾瓶-固相萃取儀裝置
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