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培養(yǎng)基廢液抽吸裝置滅菌和防污染的方法、注意事項(xiàng)介紹

來(lái)源:上海領(lǐng)德儀器有限公司   2025年07月20日 21:02  

       在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中,培養(yǎng)基上清廢液真空吸引裝置是重要的工具。這類裝置直接接觸培養(yǎng)環(huán)境,其滅菌效果直接關(guān)系到細(xì)胞培養(yǎng)的成敗——沒(méi)有有效消毒可能引入微生物污染,導(dǎo)致整個(gè)實(shí)驗(yàn)失敗,造成時(shí)間與資源上的重大損失13。因此,建立科學(xué)、系統(tǒng)的滅菌流程至關(guān)重要。

一、培養(yǎng)基廢液抽吸泵日程關(guān)鍵防污染措施

1.高溫高壓滅菌:這是最主要和常見(jiàn)的方式,能夠有效殺滅細(xì)菌、真菌及其孢子。

2.防菌滯留:向瓶?jī)?nèi)吸入少量稀釋消毒液,如0. 1%次氯酸鈉,廢液抽吸后,可抑制收集期內(nèi)微生物繁殖。

3.吸頭適配器與一次性耗材:?jiǎn)蔚馈?道吸頭適配器,每次使用后應(yīng)滅菌,防止交叉污染。需要特別注意的是,吸頭適配器并非直接用于吸液,一般需要插上一次性Tip槍頭。

二、裝置結(jié)構(gòu)與分區(qū)滅菌策略

       在了解上述常用的防污染措施后,我們?cè)賮?lái)詳細(xì)介紹設(shè)備不同組成部分所對(duì)應(yīng)的不同消毒滅菌方法。由于廢液真空吸引裝置通常由主機(jī)機(jī)體與液體接觸附件(集液瓶、吸頭適配器、吸液管等)兩大部分構(gòu)成,不同部分的材質(zhì)、結(jié)構(gòu)與功能差異決定了滅菌方法的區(qū)別。

1. 主機(jī)機(jī)體

       主機(jī)雖然不直接接觸培養(yǎng)液,但作為整體系統(tǒng)的一部分,其表面消毒也很重要,否則可能會(huì)影響細(xì)胞房環(huán)境。常見(jiàn)的滅菌方式包括:

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1)75%酒精擦拭:實(shí)驗(yàn)前后使用無(wú)菌布浸潤(rùn)酒精全面擦拭機(jī)體表面,尤其注意按鈕、接口等易忽略部位。

2)紫外燈照射:在細(xì)胞房整體紫外消毒時(shí),設(shè)備外殼可耐受紫外照射,無(wú)老化褪色風(fēng)險(xiǎn)。

         專門(mén)用于抽吸培養(yǎng)基上清廢液的產(chǎn)品在設(shè)計(jì)時(shí)也會(huì)考慮到這方面,如BSUD-S204P4A型號(hào)采用全不銹鋼外殼,表面光滑,便于清潔和滅菌,同時(shí)不銹鋼材料長(zhǎng)久受紫外照射也不會(huì)有所影響,普通塑料材質(zhì)長(zhǎng)期照射易脆化開(kāi)裂。再比如全新款的BV300EP2實(shí)驗(yàn)室2升臺(tái)式吸液泵的外殼為全密閉,正面沒(méi)有散熱孔,便于噴灑酒精。

2. 液體接觸附件(廢液瓶、管路及吸頭適配器)

        這些部件直接接觸廢液,是污染防控的核心,需采用更強(qiáng)效的滅菌方式,主要包括:

1)高溫高壓滅菌法:

將廢液收集瓶(PP聚丙烯材質(zhì))、泵管、手持操作器(POM聚甲醛材質(zhì))、吸頭適配器等拆卸后,置于高壓滅菌鍋內(nèi)121°C條件下滅菌30分鐘,能殺滅細(xì)菌、真菌及其孢子。需要注意的是滅菌后必須烘干,避免殘留水分被吸入主機(jī)導(dǎo)致設(shè)備損壞。

2)化學(xué)消毒液浸泡法:

日常連續(xù)使用期間,無(wú)法每次抽取后立即高壓滅菌。推薦使用含氯消毒液,如次氯酸鈉適當(dāng)稀釋液,能有效抑制瓶?jī)?nèi)及管路中微生物滋生。這里需要注意的是消毒液浸泡后必須用清水沖洗,避免化學(xué)殘留腐蝕部件或影響后續(xù)細(xì)胞操作。此外廢液瓶材質(zhì)需要能夠耐受含氯的消毒液,如使用PP聚丙烯材質(zhì)制作廢液瓶的BV300AP2和聚砜類材質(zhì)制作廢液瓶的BV300EP,都可以使用這種防止長(zhǎng)菌的方法。

三、操作流程規(guī)范與常見(jiàn)錯(cuò)誤規(guī)避

為確保滅菌有效且設(shè)備安全,需建立嚴(yán)格的操作規(guī)范,下面是一些常見(jiàn)的注意事項(xiàng):

●滅菌后組裝:部件烘干后再連接,濕態(tài)組裝導(dǎo)致主機(jī)電路短路。

●廢液處理:121°C高壓滅菌30分鐘再丟棄,直接傾倒污染環(huán)境。

●管路清潔:如使用次氯酸鈉浸泡,滅菌前,需要用清水充分沖洗各部件,消毒液殘留腐蝕部件。

●設(shè)備存放:置于潔凈、干燥環(huán)境,有條件的可以遮蓋防塵,隨意放置致二次污染。

●避免使用非實(shí)驗(yàn)室專用的吸液設(shè)備,如醫(yī)用或民用吸液裝置,其材質(zhì)可能無(wú)法耐受高溫高壓或消毒液。

●除不銹鋼和鋁合金機(jī)體型號(hào)外,紫外消毒時(shí)主機(jī)需暴露于照射范圍,勿用普通塑料罩覆蓋。

四、總結(jié)

培養(yǎng)基廢液吸取裝置的滅菌管理是一項(xiàng)系統(tǒng)性工程,需結(jié)合設(shè)備材質(zhì)特性、使用頻率及實(shí)驗(yàn)室條件,綜合運(yùn)用物理滅菌(高溫高壓、紫外)與化學(xué)消毒(酒精、含氯制劑)手段。尤其重視直接接觸廢液的附件滅菌,并養(yǎng)成“操作前檢查,操作中防護(hù),操作后處理”的習(xí)慣。唯有將嚴(yán)謹(jǐn)?shù)臏缇绦騼?nèi)化為實(shí)驗(yàn)規(guī)范,才能為細(xì)胞培養(yǎng)筑起可靠的“無(wú)菌防線”,確??蒲薪Y(jié)果的準(zhǔn)確性與可重復(fù)性。


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