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來了解活性氧檢測原理

來源:北京索萊寶科技有限公司   2025年07月21日 17:29  

 活性氧檢測試劑盒(Reactive Oxygen Species Assay Kit)是一種利用熒光探針 DCFH-DA進行活性氧檢測的試劑盒。DCFH-DA 本身沒有熒光,可以自由穿過細胞膜,進入細胞內(nèi)后,可以被細胞內(nèi)的酯酶水解生成DCFH。而 DCFH 不能通透細胞膜,從而使探針很容易被裝載到細胞內(nèi)。細胞內(nèi)的活性氧可以氧化無熒光的DCFH 生成有熒光的DCF 。檢測DCF 的熒光就可以知道細胞內(nèi)活性氧的水平。

對于原位裝載探針的樣品可以用激光共聚焦顯微鏡直接觀察,或收集細胞后用熒光分光光度計、熒光酶標儀或流式細胞儀檢測。對于收集細胞后裝載探針的樣品可以用熒光分光光度計、熒光酶標儀或流式細胞儀檢測,也可以用激光共聚焦顯微鏡直接觀察。


注意事項: 

  1. 探針裝載后,一定要洗凈殘余的未進入細胞內(nèi)的探針,否則會導致背景較高。

  2. 探針裝載完畢并洗凈殘余探針后,可以進行激發(fā)波長的掃描和發(fā)射波長的掃描,以確認探針的裝載情況是否良好。DCF 的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜請參考上圖。

  3. 盡量縮短探針裝載后到測定所用的時間(刺激時間除外),以減少各種可能的誤差。

  4.  為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。


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