人RNA結(jié)合基元蛋白8A(RBM8A)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書(shū)

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　　BS-1656 人RNA結(jié)合基元蛋白8A(RBM8A)Elisa試劑盒

　　實(shí)驗(yàn)原理?

　　采用雙抗體夾心法(ELISA)定量檢測(cè)樣本中的RBM8A蛋白?：

　　包被抗體?：微孔板預(yù)包被抗RBM8A捕獲抗體。

　　抗原結(jié)合?：加入樣本/標(biāo)準(zhǔn)品后，目標(biāo)蛋白與捕獲抗體結(jié)合。

　　檢測(cè)抗體?：加入HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體形成復(fù)合物。

　　顯色反應(yīng)?：TMB底物在HRP催化下顯色(藍(lán)→黃)，顏色深度與RBM8A濃度正相關(guān)?。

　　樣本處理與保存?

　　樣本類(lèi)型?：血清、血漿、細(xì)胞上清液、組織勻漿?。

　　處理要求?：

　　血清/血漿：離心去除顆粒(1000×g，10-30分鐘)?。

　　組織勻漿：生理鹽水搗碎后離心取上清?。

　　保存條件?：分裝后-70℃保存，避免反復(fù)凍融或溶血?。

　　試劑盒組成?

　　包被微孔板、標(biāo)準(zhǔn)品(濃度梯度：78-5000 pg/mL或類(lèi)似范圍)?。

　　HRP標(biāo)記檢測(cè)抗體、TMB顯色液、終止液、洗滌緩沖液等?。

　　需自備器材?：酶標(biāo)儀(450nm)、移液器、恒溫箱、蒸餾水?。

　　操作步驟?

　　標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?：按說(shuō)明書(shū)梯度稀釋(如5000→78 pg/mL)?。

　　加樣與孵育?：

　　每孔加入50μL樣本/標(biāo)準(zhǔn)品，37℃孵育1小時(shí)?。

　　洗滌?：清洗未結(jié)合物質(zhì)(建議自動(dòng)洗板機(jī)浸泡30秒)?。

　　顯色與終止?：

　　加入TMB顯色液(避光)，37℃反應(yīng)15分鐘。

　　加入終止液后立即測(cè)定OD值(450nm)?。

　　注意事項(xiàng)?

　　質(zhì)量控制?：

　　批內(nèi)/批間精密度CV應(yīng)<12%?。

　　標(biāo)準(zhǔn)曲線需呈線性(R2≥0.99)?。

　　干擾因素?：避免溶血、脂血樣本及細(xì)菌污染?。

　　適用范圍?：僅供科研使用，不可用于臨床診斷?。

　　結(jié)果計(jì)算?

　　以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)繪制曲線，擬合方程計(jì)算樣本濃度?。

　　若樣本OD值超出標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍，需適當(dāng)稀釋后重測(cè)?。

　　注：以上資料僅供參考，如需進(jìn)一步技術(shù)支持或代測(cè)服務(wù)，可聯(lián)系相關(guān)供應(yīng)商?。

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