GW5074-NHS Ester是一種用于生物標(biāo)記的化合物。 

基團(tuán)分析：

GW5074的分子基礎(chǔ)：GW5074是一種選擇性c-Raf1激酶抑制劑，其核心結(jié)構(gòu)含溴代吲哚環(huán)，通過(guò)抑制Raf/MEK/ERK信號(hào)通路調(diào)控細(xì)胞增殖，具有細(xì)胞膜滲透性強(qiáng)的特性。

NHS Ester的化學(xué)功能：NHS Ester是一種高反應(yīng)性活化基團(tuán)，可與生物分子的伯胺基發(fā)生親核取代反應(yīng)，形成穩(wěn)定的酰胺鍵（-CONH-），在GW5074-NHS Ester中，NHS Ester通過(guò)連接臂（如PEG鏈）與GW5074結(jié)合，使其具備靶向標(biāo)記能力。

復(fù)合物結(jié)構(gòu)：結(jié)構(gòu)包含三部分：GW5074（激酶抑制功能域）、連接臂（PEG鏈，增強(qiáng)水溶性并減少空間位阻）、NHS Ester（共價(jià)結(jié)合域）。

中文名：GW5074-琥珀酰亞胺酯

英文名：GW5074-NHS Ester 

規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)：1mg、5mg、10mg 

實(shí)驗(yàn)步驟：

樣品準(zhǔn)備：目標(biāo)分子溶解于PBS或HEPES緩沖液（pH 7.5–8.5），避免含氨基試劑干擾。

試劑活化：GW5074-NHS Ester以無(wú)水DMSO配制成1–10 mM母液，冰上避光保存。

反應(yīng)混合：按摩爾比混合，室溫或4℃避光反應(yīng)2–4小時(shí)。

終止與純化：加入甘氨酸或冷甲醇終止反應(yīng)，通過(guò)凝膠過(guò)濾/HPLC去除游離試劑。

產(chǎn)物驗(yàn)證：SDS-PAGE或質(zhì)譜確認(rèn)標(biāo)記效率。

注意事項(xiàng)：

pH控制：pH > 8.5可能致水解加速；pH < 7.0則反應(yīng)效率下降。

防護(hù)措施：穿戴防護(hù)鏡、手套及口罩，避免皮膚接觸。

廢棄物處理：分類(lèi)收集有機(jī)廢液，交由專(zhuān)業(yè)機(jī)構(gòu)處理。

標(biāo)記優(yōu)化：高濃度蛋白（>2 mg/mL）可減少非特異性結(jié)合；低溫反應(yīng)降低聚集風(fēng)險(xiǎn)。

相關(guān)應(yīng)用：

激酶信號(hào)研究：標(biāo)記抗體/蛋白質(zhì)，用于Western Blot、免疫熒光檢測(cè)信號(hào)通路活性。

藥物靶向遞送：構(gòu)建抗體-藥物偶聯(lián)物 。

細(xì)胞成像與追蹤：結(jié)合熒光基團(tuán)，實(shí)現(xiàn)激酶定位的動(dòng)態(tài)可視化。

診斷平臺(tái)開(kāi)發(fā)：用于超高靈敏度免疫分析，通過(guò)信號(hào)放大提升檢測(cè)限。