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GW5074-NHS Ester是一種用于生物標(biāo)記的化合物

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    2025年07月22日
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GW5074-NHS Ester
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資料簡(jiǎn)介

理論分析:

GW5074-NHS Ester是一種用于生物標(biāo)記的化合物。 

基團(tuán)分析:

GW5074的分子基礎(chǔ):GW5074是一種選擇性c-Raf1激酶抑制劑,其核心結(jié)構(gòu)含溴代吲哚環(huán),通過(guò)抑制Raf/MEK/ERK信號(hào)通路調(diào)控細(xì)胞增殖,具有細(xì)胞膜滲透性強(qiáng)的特性。

NHS Ester的化學(xué)功能:NHS Ester是一種高反應(yīng)性活化基團(tuán),可與生物分子的伯胺基發(fā)生親核取代反應(yīng),形成穩(wěn)定的酰胺鍵(-CONH-),在GW5074-NHS Ester中,NHS Ester通過(guò)連接臂(如PEG鏈)與GW5074結(jié)合,使其具備靶向標(biāo)記能力。

復(fù)合物結(jié)構(gòu):結(jié)構(gòu)包含三部分:GW5074(激酶抑制功能域)、連接臂(PEG鏈,增強(qiáng)水溶性并減少空間位阻)、NHS Ester(共價(jià)結(jié)合域)。

中文名:GW5074-琥珀酰亞胺酯

英文名:GW5074-NHS Ester 

規(guī)格標(biāo)準(zhǔn):1mg、5mg、10mg 

實(shí)驗(yàn)步驟:

樣品準(zhǔn)備:目標(biāo)分子溶解于PBS或HEPES緩沖液(pH 7.5–8.5),避免含氨基試劑干擾。

試劑活化:GW5074-NHS Ester以無(wú)水DMSO配制成1–10 mM母液,冰上避光保存。

反應(yīng)混合:按摩爾比混合,室溫或4℃避光反應(yīng)2–4小時(shí)。

終止與純化:加入甘氨酸或冷甲醇終止反應(yīng),通過(guò)凝膠過(guò)濾/HPLC去除游離試劑。

產(chǎn)物驗(yàn)證:SDS-PAGE或質(zhì)譜確認(rèn)標(biāo)記效率。

注意事項(xiàng):

pH控制:pH > 8.5可能致水解加速;pH < 7.0則反應(yīng)效率下降。

防護(hù)措施:穿戴防護(hù)鏡、手套及口罩,避免皮膚接觸。

廢棄物處理:分類(lèi)收集有機(jī)廢液,交由專(zhuān)業(yè)機(jī)構(gòu)處理。

標(biāo)記優(yōu)化:高濃度蛋白(>2 mg/mL)可減少非特異性結(jié)合;低溫反應(yīng)降低聚集風(fēng)險(xiǎn)。

相關(guān)應(yīng)用:

激酶信號(hào)研究:標(biāo)記抗體/蛋白質(zhì),用于Western Blot、免疫熒光檢測(cè)信號(hào)通路活性。

藥物靶向遞送:構(gòu)建抗體-藥物偶聯(lián)物 。

細(xì)胞成像與追蹤:結(jié)合熒光基團(tuán),實(shí)現(xiàn)激酶定位的動(dòng)態(tài)可視化。

診斷平臺(tái)開(kāi)發(fā):用于超高靈敏度免疫分析,通過(guò)信號(hào)放大提升檢測(cè)限。

包裝:

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