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當(dāng)前位置:上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司>>技術(shù)文章>>沙門氏菌的威脅和檢測
一、為何沙門氏菌是SPF級(jí)動(dòng)物的“公敵"?
沙門氏菌并非單一細(xì)菌,而是一個(gè)龐大的家族(屬)——沙門氏菌屬(Salmonella)。它們具備很強(qiáng)的環(huán)境適應(yīng)力,潛在危害大:
1. 人畜共患:可感染人類及大量溫血?jiǎng)游?,?shí)驗(yàn)大鼠、小鼠、兔、豚鼠、禽類等均易感。
2. 隱匿性強(qiáng):動(dòng)物感染后可能表現(xiàn)為急性敗血癥、腸炎(腹瀉、便血),也可能呈隱性感染,動(dòng)物外觀健康卻持續(xù)排毒,成為“移動(dòng)傳染源"。
3. 急性感染:可導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)動(dòng)物群大規(guī)模急性死亡。剖檢可見肝脾腫大、壞死灶,腸道出血、潰瘍等特征病變。
4. 慢性感染/隱性感染:這才是科研的“隱形殺手"!感染動(dòng)物可能出現(xiàn)生長發(fā)育遲緩、免疫機(jī)能異常,干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
5. 病理模型失真:沙門氏菌引起的肝、脾、腸道等器官的病理變化,會(huì)混淆或掩蓋實(shí)驗(yàn)誘導(dǎo)的病變,導(dǎo)致數(shù)據(jù)解讀錯(cuò)誤。
6. 免疫研究偏差:沙門氏菌感染會(huì)刺激免疫系統(tǒng),改變動(dòng)物的免疫狀態(tài),使免疫相關(guān)實(shí)驗(yàn)(如藥效評(píng)價(jià)、疫苗研究)的結(jié)果失去可靠性。
7. 代謝研究異常:腸道炎癥和功能損傷影響營養(yǎng)吸收和代謝,干擾代謝性疾病或藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究。
8. 污染途徑多樣:可通過污染的飼料、飲水、墊料、籠具,甚至野生嚙齒動(dòng)物或人員傳播,防控難度大。
二、傳統(tǒng)檢測與分子技術(shù)
傳統(tǒng)的沙門氏菌檢測主要依賴分離培養(yǎng)與生化鑒定。雖然這是經(jīng)典方法,但在實(shí)際應(yīng)用中面臨挑戰(zhàn):
1. 耗時(shí)長:從增菌、分離到生化確認(rèn),通常需要數(shù)天,影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物周轉(zhuǎn)和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。
2. 靈敏度局限:對(duì)于低載量感染或經(jīng)抗生素治療后的動(dòng)物,培養(yǎng)法漏檢率較高。
3. 操作復(fù)雜,易受干擾:糞便樣本成分復(fù)雜,雜菌(尤其是形態(tài)相似的變形桿菌)可能掩蓋目標(biāo)菌或?qū)е抡`判。需要經(jīng)驗(yàn)豐富的技術(shù)人員進(jìn)行細(xì)致的菌落觀察和生化反應(yīng)判讀。
4. 對(duì)隱性感染檢出率不高:隱性感染動(dòng)物排菌可能呈間歇性或菌量低,傳統(tǒng)方法檢出率受限。
面對(duì)沙門氏菌的威脅和傳統(tǒng)檢測的局限,分子生物學(xué)技術(shù),特別是實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)展現(xiàn)出優(yōu)勢:
1. 靈敏度高:可檢測出樣本中極微量的沙門氏菌特異性DNA,顯著提高對(duì)低載量感染和隱性感染的檢出能力。
2. 特異性強(qiáng):精準(zhǔn)識(shí)別沙門氏菌屬特異性基因序列,有效避免變形桿菌等雜菌的干擾,減少假陽性和假陰性。
3. 快速高效:通常在樣品處理后數(shù)小時(shí)內(nèi)即可獲得結(jié)果,大大縮短檢測周期,加速實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量評(píng)估和實(shí)驗(yàn)進(jìn)程。
4. 通量高、標(biāo)準(zhǔn)化:易于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化操作和批量檢測,結(jié)果判讀客觀,減少人為誤差,保證檢測的一致性和可靠性。
翼和解決方案:守護(hù)SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的純凈
針對(duì)SPF級(jí)大小鼠國標(biāo)病原體監(jiān)測的嚴(yán)格要求,翼和生物開發(fā)了SPF大小鼠國標(biāo)病原體qPCR系列檢測試劑盒。其中,國標(biāo)必檢病原菌多重檢測試劑盒正是為解決包括沙門氏菌屬在內(nèi)的八項(xiàng)國標(biāo)必檢病原菌精準(zhǔn)篩查而設(shè)計(jì):
一盒多檢:單次反應(yīng)可同時(shí)檢測沙門氏菌屬及國標(biāo)要求的其他必檢病原菌,效率倍增,成本更優(yōu)。
qPCR核心技術(shù):采用經(jīng)過嚴(yán)格驗(yàn)證的特異性引物探針及優(yōu)化的反應(yīng)體系,確保對(duì)沙門氏菌屬DNA的高靈敏度、高特異性捕獲與擴(kuò)增。
結(jié)果可靠:含內(nèi)參對(duì)照,有效避免假陰性,保障結(jié)果可靠性。
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