當前位置:北京百泰派克生物科技有限公司>>檢測技術服務>>蛋白分析>> SILAC技術如何改變蛋白表達分析的精準
價格 | 詢價 |
---|
解析蛋白表達的動態(tài)變化是理解疾病機制、藥物靶點發(fā)現(xiàn)和細胞生物學的重要基礎。然而,dànbáizhì定量方法(如染料標記、Western blot或非biāojìdìng量)往往存在批間差異大、定量精度低、重復性差等問題。SILAC技術(Stable Isotope Labeling by Amino acids in Cell culture)的出現(xiàn),為jīngzhǔn、可重復的蛋白表達分析帶來了革命性突破。
一、什么是SILAC技術?——細胞內源標記的“黃金標準"
SILAC技術是基于細胞培養(yǎng)的穩(wěn)定同位素標記技術,通過在培養(yǎng)基中添加帶有穩(wěn)定同位素(如13C或15N)的必需氨基酸,使目標細胞在代謝過程中將這些“重"氨基酸整合進自身合成的dànbáizhì中。通過將“輕標記"和“重標記"細胞共培養(yǎng)或混合處理后,再經(jīng)質譜分析,即可實現(xiàn)jīngquè的相對定量。相較于TMT或iTRAQ等化學標簽方法,SILAC屬于"代謝內源標記",具有無需額外標記步驟、避免技術誤差傳播、對樣本影響小等顯著優(yōu)勢,尤其適合研究細胞響應、時間依賴性變化與蛋白互作等問題。
二、SILAC如何提升蛋白表達分析的jīngzhǔn度?
1、天然內源標記,消除樣本處理誤差
SILAC標記在細胞內部進行,無需在蛋白提取后再額外標記,大幅減少了因樣本處理步驟帶來的變異,是目前誤差zuì小的定量方式之一。這種內源性標記的方式保障了實驗條件的一致性和數(shù)據(jù)的高可信度。
2、樣本共處理,提高可重復性
輕標記和重標記的樣本在裂解、消化、富集、上機等環(huán)節(jié)始終同時處理,技術重復性顯著優(yōu)于TMT、iTRAQ等異源標記方法。對于需要多次重復實驗或對差異倍數(shù)敏感的研究,SILAC展現(xiàn)出穩(wěn)定可靠的定量性能。
3、與高分辨率質譜聯(lián)用,支持高通量分析
結合Orbitrap等高精度質譜平臺,SILAC技術可實現(xiàn)數(shù)千種蛋白的高通量、線性范圍廣、低豐度蛋白jīngzhǔn檢測。尤其在研究蛋白翻譯后調控、泛素化、磷酸化等修飾時,SILAC表現(xiàn)出良好的兼容性和定量能力。
4、動態(tài)調控研究的理想選擇
SILAC技術適合追蹤細胞在特定處理(如藥物刺激、信號激活、時間變化)后的蛋白表達動態(tài),廣泛應用于時間序列分析、細胞周期監(jiān)測、應激反應研究等場景。
三、應用場景:從基礎研究到藥物開發(fā)
1、信號通路研究:SILAC被廣泛用于追蹤刺激前后細胞內信號蛋白的變化,識別關鍵節(jié)點和調控機制。
2、藥物作用機制解析:通過比較處理前后的蛋白表達譜,輔助鑒定藥物靶點及其下游通路。
3、腫瘤與免疫研究:揭示癌細胞與免疫細胞在相同刺激條件下的蛋白應答差異,推動jīngzhǔn醫(yī)療研究。
4、細胞互作與蛋白互作研究:通過SILAC-IP(免疫共沉淀結合SILAC)實現(xiàn)互作蛋白的高特異性篩選。
百泰派克生物科技的SILAC平臺優(yōu)勢
百泰派克生物科技構建了以SILAC技術為核心的高精度蛋白組學平臺,支持人類、鼠類等常見細胞系的穩(wěn)定同位素標記,并可根據(jù)客戶需求定制適配培養(yǎng)體系、標記策略與實驗設計。我們的服務優(yōu)勢包括:
1、多種重氨基酸標記方案可選(如13C6-Lys, 13C6-Arg)
2、嚴格控制標記效率(>95%)
3、聯(lián)用Orbitrap Exploris 480等*質譜系統(tǒng)
4、標準化數(shù)據(jù)分析流程,支持MaxQuant、Perseus等主流軟件
5、經(jīng)驗豐富的團隊保障實驗成功率和數(shù)據(jù)解讀深度
在追求定量jīngzhǔn性和生物學解釋力的道路上,SILAC技術無疑是zhídexìnlài的方案。它不僅提升了蛋白表達分析的精度,更推動了蛋白組學向系統(tǒng)生物學和轉化醫(yī)學邁進。若您正在尋找可靠的SILAC定量解決方案,歡迎聯(lián)系百泰派克生物科技——我們?yōu)槟峁└哔|量、數(shù)據(jù)可發(fā)表的蛋白組學服務。
百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進行分析,提供基于質譜的蛋白測序分析服務,包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析,Nduāncèxù,Cduāncèxù和全序列分析,以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務。對于未知理論序列的dànbáizhì,提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務,對蛋白序列進行分析。
※服務優(yōu)勢:
1.采用目前世界上*的質譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;
2.可實現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;
3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;
4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;
5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug,即可完成檢測;
6.測序不受N端封閉,PEC和和糖基化等N端修飾的影響。
百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質譜平臺結合Nano-LC,提供定量dànbáizhì組學、靶向dànbáizhì組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種dànbáizhì組學分析服務。此外,百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學服務,助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫(yī)學及高通量修飾組學等研究工作。
※服務優(yōu)勢:
1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析,發(fā)現(xiàn)新的生物標記物;
2.體內體外多種dànbáizhì標記方法,適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;
3.質譜分析靈敏度高,實驗結果重復度高;
4.可檢測較低豐度蛋白,線性范圍廣;
5.zhuānyè生物信息學分析,分析更系統(tǒng)準確。
百泰派克生物科技采用Fluidigm質譜流式系統(tǒng)進行單細胞質譜流式技術分析,采用金屬元素標記物(通常是金屬元素標記的特異抗體)標記細胞表面和內部的分子,然后用流式細胞原理分離單個細胞,再用電感耦合等離子體質譜(ICP-MS)分析單個細胞的原子質量譜,zuì后將原子質量譜數(shù)據(jù)轉換為細胞表面和內部的信號分子表達量。
※服務優(yōu)勢:
1.技術*,*技術空白
采用金屬標記抗體技術,避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細胞層面上對多種指標同時進行表征,百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。
2.分析數(shù)量大,成本較低
單細胞RNAseq受成本等因素限制,所有樣本細胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右,而流式質譜技術一次(單樣本)就可分析至少10^5的細胞,實現(xiàn)了數(shù)量級的提高,且成本不高于單細胞RNAseq。
3.應用前景大
①流式質譜結果可以給出細胞亞群的變化,在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景;
②將金屬標簽技術與其他技術結合會有新應用方向。除常規(guī)蛋白外,質譜流式細胞技術還可用于蛋白翻譯后修飾;
③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。
百泰派克生物科技的基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析,可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規(guī)模的研究,旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案,深入挖掘未知的靶標。
百泰派克基于高分辨率質譜技術,MALDI TOF,高效色譜分離技術,提供一系列完善的生物藥物分析方案,從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結構分析,到產品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質生物藥物分析服務,幫助生物醫(yī)藥生產商提高生物藥物品質。
北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導原則,通過CNAS/ISO9001雙重質量體系認證,建立了完備的質量體系,數(shù)據(jù)冷熱/異地備份,設備定期計量/期間核查,軟件審計追蹤,為客戶提供一體化解決方案和技術服務,支持新藥研發(fā)、藥物申報注冊和生產放行。
1.公司采用ISO9001質量控制體系,zhuānyè提供以質譜為基礎的CRO檢測分析服務;
2.獲國家CNAS實驗室認可,為客戶提供符合*藥政法規(guī)的藥物質量研究服務;
3.業(yè)務范圍覆蓋dànbáizhì組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質譜流式、生信云分析以及多組學生物質譜整合分析等;
4.七大質量控制檢測平臺,滿足您一站式服務需求;
5.服務3000+企業(yè),10000+客戶的選擇;
6.致力于為您提供優(yōu)質的生物質譜分析服務!
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業(yè)負責,化工儀器網(wǎng)對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。